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生物学论文_正链RNA病毒复制关键酶的结构、功
文章目录
总序
第一部分 甲型肝炎病毒非结构蛋白2C结构与功能研究
摘要
Abstract
第一章 引言
1.1 甲型肝炎病毒的流行病学研究
1.2 甲型肝炎病毒的基本概述
1.3 甲型肝炎病毒的基因组结构及病毒蛋白成熟
1.4 甲型肝炎病毒的生命周期
1.5 2C蛋白的在微小RNA病毒家族(PICORNAVIRUS)中的功能
1.5.1 2C蛋白在病毒转录复制过程中的作用
1.5.2 2C蛋白在免疫逃逸过程中的作用
1.5.3 2C蛋白在病毒粒子组装过程中的作用
1.6 2C蛋白的结构与功能研究进展
1.6.1 2C蛋白的结构特征
1.6.2 2C蛋白的功能特征
1.7 靶向2C蛋白的抑制剂的研究进展
1.8 小结
本课题研究的内容和意义
1. 2C蛋白的结构生物学研究
2. 2C蛋白生物化学性质分析
3. 2C蛋白对病毒转录复制的影响
4. 研究意义
第二章 实验材料及方法
2.1 实验材料
2.1.1 细菌种类和细胞类型
2.1.2 质粒构建
2.1.3 引物及核酸底物
2.1.4 常用试剂和溶液及其配置方法
2.1.5 常用仪器设备
2.2 实验方法
2.2.1 2C蛋白序列分析
2.2.2 质粒构建
2.2.3 蓝白斑的筛选
2.2.4 杆粒抽提和鉴定
2.2.5 蛋白表达
2.2.6 蛋白纯化
2.2.7 2C蛋白晶体制备
2.2.8 2C蛋白结构解析
2.2.9 2C蛋白ATPase活性鉴定
2.2.10 2C蛋白RNA核酸酶活性检测
2.2.11 甲肝病毒小型复制子实验
第三章 结果及分析
3.1 HAV 2C蛋白序列分析
3.2 HAV 2C蛋白的预表达及晶体初筛
3.3 蛋白晶体的优化
3.4 蛋白晶体数据收集和结构解析
3.5 结构及分析
3.5.1 甲肝病毒2CAN127结构特征
3.5.2 蛋白间结构对比
3.5.3 HAV 2C蛋白的自组装
3.6 2C蛋白的功能研究
3.6.1 甲肝病毒2C蛋白的ATPase酶活检测
3.6.2 2C蛋白不同结构域对病毒转录复制的影响
3.6.3 2C蛋白具有核酸外切酶活性
3.6.4 核酸酶活性中心的发现
3.6.5 蛋白具有核酸结合能力
3.6.6 HAV 2C核酸酶对甲肝病毒转录复制的影响
3.6.7 微小RNA病毒2C蛋白普遍具有核酸酶活性
3.7 2C蛋白六聚体模型及功能分析
第四章 结论和讨论
4.1 甲肝病毒2C蛋白具有与其他肠道病毒2C蛋白相似的结构特征
4.2 甲肝病毒2C蛋白和其他2C蛋白一样具有单链核酸酶活性
4.3 基于2C结构和功能的抗病毒药物的研究
第二部分 新冠病毒Nsp3木瓜样蛋白酶(PLpro)结构域结构及其抑制剂的研究
摘要
Abstract
第一章 引言
第二章 实验材料及方法
2.1 质粒的构建及蛋白表达纯化
文章来源:《中国医学科学院学报》 网址: http://www.zgyxkxyxbbjb.cn/qikandaodu/2022/0309/703.html